Bacterial environment and susceptibility to the disinfectants : setting a rapid technic to determine, in situ, the lethal efficiency of antimicrobial agents
Environnement des bactéries et sensibilité aux biocides : mise au point d'une technique rapide pour déterminer in situ l'efficacité bactéricide d'agents antimicrobiens
Résumé
Controlling the hygiene status of surfaces remains a constant concern in different areas. Indeed, the biofouling of surfaces can be a source of dramatic public health problems in food industries (food toxi-infections) or in hospitals (nosocomial infections). The efficiency of biocides remains variable from one application to the others (especially on adherent micro-organisms), it is necessary to improve the disinfectant formula and/or the associated procedures of disinfection. This improvement involves new test methods that allow rapid assessment of the antibacterial activity of marketed or not products, in conditions closed to the reality. So, through this work, we defined a protocol to determine lethal activity of biocides on sessile bacteria, protocol made up of four principal steps: i) selection of micro-organisms and standardisation of their storage and growth conditions, ii) setting a reproductible adhesion protocol of bacteria on soiled or not surfaces, iii) disinfection test on sessile micro-organisms and iv) optimisation of this protocol for in situ observations and reducing the time needed to obtain results by employing fluorescent markers which give indications on cellular viability.
La maîtrise de l'hygiène des surfaces demeure une préoccupation constante dans de nombreux secteurs d'activité. En effet, la contamination microbiologique des surfaces peut être à l'origine de problèmes de santé publique plus ou moins sévères dans les industries agro-alimentaires (toxi-infections alimentaires) ou le milieu médical (infections nosocomiales). L'efficacité des agents désinfectants restant variable d'une application à l'autre (notamment sur des micro-organismes adhérant), il s'avère nécessaire d'améliorer les formulations désinfectantes et/ou les procédures de désinfection qui y sont associées. Cette amiélioration passe par la mise en place de méthodes tests permettant d'évaluer rapidement l'activité antimicrobienne de produits commercialisés ou non, dans des conditions proches de la réalité. Ainsi, au cours de ce travail, nous avons défini un protocole pour déterminer l'activité létale des produits désinfectants sur cellules adhérentes, protocole composé de quatre étapes principales : i) choix des micro-organismes et standardisation de leurs conditions de conservation et de croissance, ii) mise en place d'un protocole d'adhésion reproductible sur supports conditionnés ou non, iii) test de désinfection sur cellules adhérentes et iv) optimisation de ce protocole dans le caractère in situ et le délai d'obtention des résultats par l'utilisation de marqueurs fluorescents, indicateurs de la viabilité cellulaire.