Analyse des propriétés d'un variant d'épissage de la cycline B et caractérisation d'un de ses partenaires
Résumé
La cycline B est un des régulateurs clef du cycle cellulaire, associée à Cdc2 elle forme
le MPF (Maturation Promoting Factor). Ce complexe contrôle la transition entre phases G2 et
M du cycle cellulaire. Au laboratoire, un variant d'épissage de la cycline B d'oursin a été
découvert. Il lui manque la partie C-terminale, dans laquelle certains résidus sont très
conservés.
Au cours de ce travail, le même variant a été cloné chez l'étoile de mer. Ses
partenaires ont été recherchés par criblage de banque en double hybride chez la levure ainsi
qu'en chromatographie d'affinité. Cette dernière technique a permis d'isoler une protéine de
15kDa (P15) qui s'associe à la cycline B même en l'absence de Cdc2. Une particularité de
cette protéine est d'exister sous trois formes alléliques. La P15 est localisée au niveau du
fuseau de division. Des exprériences de micro-injections ont montré qu'elle joue un rôle dans
la sortie de méiose, vraisemblablement en liaison avec la dégradation de la cycline B.
Parallèlement, le rôle des résidus manquant chez le variant d'épissage a été étudié par
la mutagénèse du C-terminal de Clb2 de levure. Ces résidus sont importants pour la
localisation de la cycline mais aussi pour son association correcte avec Cdc2.
le MPF (Maturation Promoting Factor). Ce complexe contrôle la transition entre phases G2 et
M du cycle cellulaire. Au laboratoire, un variant d'épissage de la cycline B d'oursin a été
découvert. Il lui manque la partie C-terminale, dans laquelle certains résidus sont très
conservés.
Au cours de ce travail, le même variant a été cloné chez l'étoile de mer. Ses
partenaires ont été recherchés par criblage de banque en double hybride chez la levure ainsi
qu'en chromatographie d'affinité. Cette dernière technique a permis d'isoler une protéine de
15kDa (P15) qui s'associe à la cycline B même en l'absence de Cdc2. Une particularité de
cette protéine est d'exister sous trois formes alléliques. La P15 est localisée au niveau du
fuseau de division. Des exprériences de micro-injections ont montré qu'elle joue un rôle dans
la sortie de méiose, vraisemblablement en liaison avec la dégradation de la cycline B.
Parallèlement, le rôle des résidus manquant chez le variant d'épissage a été étudié par
la mutagénèse du C-terminal de Clb2 de levure. Ces résidus sont importants pour la
localisation de la cycline mais aussi pour son association correcte avec Cdc2.
Domaines
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