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Theses Year : 2005

Study, regulation and application of in vivo gene transfer by electrotransfer.

Transfert de gène in vivo:
étude, régulation et application de l'électrotransfert

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Abstract

We have been dealing with different projects using a physical method of in vivo gene transfer,
called electrotransfer, widely used in mouse muscle and skin with high gene expression.
By in vivo optical imaging, we have been working on optimization of electrotransfer. We have
developed an artificial regulation system to in vivo control an exogenous gene expression based on
the antisense technology using muscular electrotransfer in mouse. We have worked on molecular
optimization of DNA electrotransfer for genetic immunization for botulinum antigen screening.
This kind of DNA immunization has been used to induce antibodies production in mouse and
rabbit. We have been studying the methylation status and the reasons for persistence of plasmid
DNA in muscle cells after electrotransfer since intramuscularly injected and electrotransferred
plasmid DNA leads to a persisting expression for more than a year.
L'électrotransfert est une technique de transfert de gène in vivo, permettant une expression
élevée du transgène dans un grand nombre de tissus. Dans ce contexte, nous avons utilisé l'imagerie
optique pour optimiser différents protocoles d'électrotransfert dans le muscle et la peau.
Nous avons développé un système de régulation de l'expression des gènes combinant le système
de régulation répressible à la tétracycline Tet-Off et une stratégie antisens. Nous avons examiné
le potentiel de l'électrotransfert d'ADN plasmidique pour l'obtention d'anticorps neutralisants à
haut titre contre les toxines botuliques A, B et E. Les animaux immunisés avec des plasmides
codant les fragments immunogènes des toxines expriment de façon endogène ces fragments de
toxines, qui servent d'antigènes et déclenchent une réponse immune. Nous avons finalement étudié
l'état de méthylation de l'ADN plasmidique après injection et électrotransfert dans le muscle
squelettique et sa possible intégration dans le génome.
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Dates and versions

tel-00011410 , version 1 (18-01-2006)

Identifiers

  • HAL Id : tel-00011410 , version 1

Cite

Capucine Trollet. Transfert de gène in vivo:
étude, régulation et application de l'électrotransfert. Biochimie [q-bio.BM]. Chimie ParisTech, 2005. Français. ⟨NNT : ⟩. ⟨tel-00011410⟩
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